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核酸提取纯化系统实际应用时的常见问题分析

更新时间:2022-10-25      点击次数:809
   核酸提取纯化系统是通过细胞裂解液裂解样本,从样本中游离出来的核酸分子被特异的吸附到磁性颗粒表面,而蛋白质等杂质不被吸附而留在溶液中,在磁场作用下,使磁性颗粒与液体分开,回收颗粒(即磁珠-核酸混合物),再用洗脱液洗脱即可以得到高纯度的核酸。
  核酸提取纯化系统的实验重复性、稳定性好,操作简单,触屏可视化界面。体积小巧、运输方便、占据实验空间小。专业的结构设计,仪器运行接近静音。操作软件设计通用性强,可适合各厂家提取试剂盒。内置电池,在突然断电情况下仍然可以继续运行。一次性磁棒套、紫外灭菌灯及排气系统(HEPA)的使用,可有效保障环境和人员的生物安全,并且可有效截留气溶胶,避免不同批次试剂间的交叉污染。
  核酸提取纯化系统实际应用时的常见问题分析:
  一、提取核酸得率较低
  1.样品量与试剂的配比要控制在一定范围,避免超过裂解能力。
  2.破碎研磨的步骤处理细节很重要,一定要充分研磨,这是核酸提取的条件。
  3.在洗脱的步骤,使用足量的洗脱液洗脱并充分混匀,避免有团块残存。
  4.实验耗材要匹配,如不同的吸附柱或磁珠的核酸吸附能力不同,也会影响核酸的得率。
  二、提取核酸出现降解
  1.提取的样品量要符合试剂的配比,尽量控制样品量达到合适比例。
  2.每个步骤都要注意充分的混合均匀,避免团块的残留影响实验结果。
  3.在洗脱时,时间过长或者温度过高,核酸有可能会降解。
  4.样本切记不可反复冻融,提取的样本要注意在合适的温度保存,长期保存尽量-80℃。
  三、提取核酸纯度不高
  1.样本量和裂解液等试剂的配比要尽量控制到合适的范围。
  2.混合均匀以确保裂解充分和没有团块残留。
  3.晾干的步骤要充分,否则可能会导致醇类等杂质的残留。
  4.磁棒振荡幅度太小或混合时间太短,磁珠上有杂质残留会影响磁珠吸附核酸的能力。
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