超微量分光光度计是一种用于微量生物分子检测的分析仪器。设计用于测量微量样本(通常为微升级别)中的核酸、蛋白质等生物分子的浓度和纯度。
超微量分光光度计基于紫外-可见光吸收光谱法,通过检测特定波长下的吸光度来确定样品中目标物质的浓度。其核心理论基础是朗伯-比尔定律,即当一束单色光穿过含有吸收物质的溶液时,光强度的减弱程度与溶液的浓度和光穿过的路径长度成正比。
超微量分光光度计的理论基础是朗伯 - 比尔定律,即当一束平行单色光通过均匀、非散射的溶液时,溶液的吸光度(A)与溶液的浓度(c)、光程(l)成正比,其数学表达式为 A=εcl,其中 ε 是物质的摩尔吸光系数。仪器通过测量样本的吸光度,在已知光程和吸光系数的情况下,就能计算出样本的浓度。
结构组成
样品检测平台:通常由石英或高透光光学玻璃制成,表面经过特殊处理以减少液体残留,有固定式微量检测槽和可移动式纳米光程芯片等设计。
光源:常用氙闪光灯、脉冲式钨灯或 LED 等,可发出覆盖紫外和可见光区的全光谱复合光。
单色器:一般为光栅,可将复合光色散成不同波长的单色光,并筛选出特定波长的光导向样本。
检测器:多为光电二极管或 CCD 阵列,能将透过样本的光信号转换为电信号,以便计算吸光度。
主要特点
样本用量少:只需 0.5-2μL 的样品即可进行测量,适合处理珍贵或有限的样品。
灵敏度高:短光程设计使其能检测较低浓度的分析物,在灵敏度要求高的应用中具有优势。
准确性高:减少了样品处理和稀释步骤,降低了错误风险,提高了测量准确性。
测量快速:无需稀释样品,可在几秒钟内完成测量,节省时间和精力。