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不同样本保存液的成本及性能对比分析

更新时间:2024-01-31      点击次数:2066
随着疫情的发展,核酸检测也百花齐放,门槛越来越低,各种产品参差不齐,价格也有高有低,这些产品在性能上有它们的差距吗?是否只是存在价格上的差异,有些产品甚至性能还不如单纯的PBS(磷酸盐缓冲液)?到底异硫氰酸胍和盐酸胍存在哪些区别?

下面,我们来做详细说明:

灭活型样本保存液主要成分有缓冲液、表面活性剂、胍盐、稳定剂和络合剂以及PH调节剂等成分组成。

样品保存液

 


缓冲液的作用是稳定PH值;表面活性剂和胍盐是蛋白变性剂,有着各自不同的作用;胍盐具有的光和热的不稳定性,稳定剂是不可少的;络合剂可以络合金属离子,避免金属离子对PCR荧光扩增的干扰;PH调节剂作为调整PH值的主要成分,作用也是至关重要的。

不同PH值颜色差异,与其他物质及含量无关。缓冲液和PH调节剂可以让保存液稳定在一个弱酸或者弱碱的范围,这个时候保存液是黄色或者橙红色,采样拭子浸泡后,随着拭子上酸性胶的溶解,采样后的试管内保存液呈黄色,偏酸性。为什么保存样本的保存液要呈弱酸性呢?因为病毒的核酸是RNA,单螺旋结构,在弱酸性条件下更稳定,对应的,DNA为双螺旋结构,在弱碱性条件下更稳定。

市场上,我们看到很多保存液呈粉紫色,其PH值在8.5以上,采样后仍呈粉红色,说明PH偏高,是非常不利于病毒核酸样本保存的。

胍盐作为一种强蛋白变性剂,是裂解的主要成分,高浓度的胍盐能够抑制Rnase的活性,是防止核酸降解的主要成分,这也是我们一贯强调胍盐浓度的主要原因。那么盐酸胍和异硫氰酸胍有什么区别呢?通常认为,盐酸胍和尿素等蛋白变性剂对蛋白变性的可能是可逆的,盐酸胍对疏水氨基酸残基的增溶作用。因为盐酸胍具有形成氢键的能力,盐酸胍在高浓度(4~8mol/L)水溶液时,可以破坏水的氢键结构,盐酸胍就成为非极性残基的较好溶剂,使之蛋白质分子内部的疏水残基伸展和溶解性增加,从而使蛋白质发生不同程度的变性。在蛋白变性速度上,盐酸胍是明显慢于异硫氰酸胍的,另外,盐酸胍的稳定性也差很多,因此,盐酸胍产品的有效期会短很多,这在大面积的核酸筛查中不明显,一旦库存放置时间较久,产品性能就会出现大幅度下降,甚至不符合要求。

表面活性剂的变性效果表现在溶解膜蛋白、破裂细胞、释放核酸,还具有一定的去污、助溶能力等方面。因此,没有表面活性剂的无泡产品,不仅核酸释放率会较低,还会存在灭活速度慢,灭活不*等情况。病毒样本存在传染性的可能。

候保存液是黄色或者橙红色,采样拭子浸泡后,随着拭子上酸性胶的溶解,采样后的试管内保存液呈黄色,偏酸性。为什么保存样本的保存液要呈弱酸性呢?因为病毒的核酸是RNA,单螺旋结构,在弱酸性条件下更稳定,对应的,DNA为双螺旋结构,在弱碱性条件下更稳定。

市场上,我们看到很多保存液呈粉紫色,其PH值在8.5以上,采样后仍呈粉红色,说明PH偏高,是非常不利于病毒核酸样本保存的。

胍盐作为一种强蛋白变性剂,是裂解的主要成分,高浓度的胍盐能够抑制Rnase的活性,是防止核酸降解的主要成分,这也是我们一贯强调胍盐浓度的主要原因。那么盐酸胍和异硫氰酸胍有什么区别呢?通常认为,盐酸胍和尿素等蛋白变性剂对蛋白变性的可能是可逆的,盐酸胍对疏水氨基酸残基的增溶作用。因为盐酸胍具有形成氢键的能力,盐酸胍在高浓度(4~8mol/L)水溶液时,可以破坏水的氢键结构,盐酸胍就成为非极性残基的较好溶剂,使之蛋白质分子内部的疏水残基伸展和溶解性增加,从而使蛋白质发生不同程度的变性。在蛋白变性速度上,盐酸胍是明显慢于异硫氰酸胍的,另外,盐酸胍的稳定性也差很多,因此,盐酸胍产品的有效期会短很多,这在大面积的核酸筛查中不明显,一旦库存放置时间较久,产品性能就会出现大幅度下降,甚至不符合要求。

表面活性剂的变性效果表现在溶解膜蛋白、破裂细胞、释放核酸,还具有一定的去污、助溶能力等方面。因此,没有表面活性剂的无泡产品,不仅核酸释放率会较低,还会存在灭活速度慢,灭活不*等情况。病毒样本存在传染性的可能。稳定剂成本较高,但是可以有效的保持胍盐的稳定性,因此也是不可少的成分。

目前市场上的绝大部分低价产品,主要通过降低胍盐含量、用盐酸胍替代异硫氰酸胍、不添加稳定剂等方法来降低成本。
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